Rambler's Top100



 
Отчет лаборатории клеточных культур
 

Изучение влияния слабого электромагнитного поля прибора «ЛАД» на пролиферацию клеточных культур нормального и злокачественного происхождения.

 

1.       Многофункциональный прибор «ЛАД».

2.       Клеточные культуры.

  Фибробласты легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) – нормальные клетки с диплоидным набором хромосом,  находящиеся на 30-40 пассаже.

  Перевиваемая клеточная линия карциномы легкого человека (А-549), морфология клеток фибробластоподобная.

  Перевиваемая клеточная линия карциномы шейки матки человека (НеLа), морфология клеток эпителиоидная.

  Т-лимфобластоидная перевиваемая линия человека (Jurkat), суспензионные клетки лимфобластоидной морфологии.

3.       Методика проведения опыта.

 Монослойные клеточные линии, культивируемые в среде ИГЛА/МЕМ + 10% сыворотки крс, снимали со стекла раствором версен/химопсин и рассевали в пенициллиновые флаконы в концентрации 20-30 тыс.клеток/мл. по 2 мл на флакон. Суспензионные клетки Jurkat, культивируемые в среде RPMI-1640 + 2% фетальной сыворотки, рассевали в концентрации 300 тыс.клеток/мл.

 Контрольные культуры культивировали в обычном термостате при температуре +370, опытные культуры культивировали в другом термостате, поставив на вложенную в него антенну от прибора. На 3-и сутки монослойные клетки снимали со стекла раствором версен/химопсин и количество выросших клеток подсчитывали в камере Фукса-Розенталя.  Показатели полученных  результатов выражали в % от контроля.

4.       Результаты.

  В первой серии опытов проводили изучение влияния разных режимов работы прибора на клетки ФЛЭЧ, А-549 и НеLа.

 Было обнаружено, что разные режимы работы прибора оказывают противоположное воздействие на нормальные и раковые клетки, причем степень воздействия на клетки изменялась по синусоиде (Рис.1). Максимальное воздействие на клетки наблюдалось при режиме работы прибора –45- и –60-, при этом нормальные и раковые клетки диаметрально противоположно отвечали на эти режимы : при показаниях прибора  - 45- наблюдалась наибольшая стимуляция пролиферации нормальных клеток ФЛЭЧ и наибольшее подавление их роста при режиме –60-. Совершенно по другому вели себя на этих режимах раковые клетки как НеLа, так и А-549 и Jurkat : на режиме –45- происходило максимальное подавление роста раковых клеток и стимуляция их роста на режиме –60-.Эффект воздействия работы прибора на раковые клетки не зависел от их происхождения и морфологии.

 

Таблица № 1. Влияние разных режимов работы прибора «ЛАД» на клеточные культуры .

 

Показания прибора

Показатели пролиферации клеток (% от контроля)

ФЛЭЧ

НеLa

А-54935

35

88,6

120

127,5

37,5

83.3

117,7

120,9

40,0

79.8

113,9

114

42,5

119,6

82.8

68,4

45,0

144,5

72.8

80,4

47,5

134,7

73.3

72,9

50,0

114

105,8

107,9

52,5

100,8

117,6

120,2

55,0

88,5

124,4

129,6

60,0

71,8

146,3

124,1

65,0

119,3

111.7

77,1

 

 

  Во второй серии опытов изучали воздействие работы прибора, работающего при постоянном режиме –45-трицательное влияние на рост раковых клеток и стимуляция роста нормальных) при продолжительном культивировании клеток в течение 14 суток. Было обнаружено, что подавление роста раковых клеток оставалось постоянным на протяжении всего культивирования (две недели ), тогда как стимуляция пролиферации нормальных клеток снижалась к 14 дню культивирования. (Рис. 2).

 

Результаты, полученные при изучении пролиферации клеток путем их прямого подсчета, полностью подтверждены в экспериментах по определению активности дыхательных ферментов (метод МТТ).

 

 

 Таблица 2. Влияние работы прибора «ЛАД» (в режиме 45 ) на пролиферацию клеток ФЛЭЧ и НеLа на протяжении 14 суток.

 

Продолжительность культивирования (в сутках)

Показатели пролиферации клеток (% от контроля)

ФЛЭЧ

НеLа

3

138,5

65,3

5

148,5

68,2

7

143,4

62,7

14

112,7

67,1

 

 

 

ГУ НИИ гриппа РАМН, лаборатория  клеточных культур.

Ведущий научный сотрудник  к.б.н. Смирнова Т.Д.

Старший научный сотрудник к.б.н. Еропкина Е.М..