 |
Изучение влияния слабого электромагнитного поля прибора «ЛАД» на пролиферацию клеточных культур нормального и злокачественного происхождения.
1. Многофункциональный прибор «ЛАД».
2. Клеточные культуры.
Фибробласты легкого эмбриона человека (ФЛЭЧ) – нормальные клетки с диплоидным набором хромосом, находящиеся на 30-40 пассаже.
Перевиваемая клеточная линия карциномы легкого человека (А-549), морфология клеток фибробластоподобная.
Перевиваемая клеточная линия карциномы шейки матки человека (НеLа), морфология клеток эпителиоидная.
Т-лимфобластоидная перевиваемая линия человека (Jurkat), суспензионные клетки лимфобластоидной морфологии.
3. Методика проведения опыта.
Монослойные клеточные линии, культивируемые в среде ИГЛА/МЕМ + 10% сыворотки крс, снимали со стекла раствором версен/химопсин и рассевали в пенициллиновые флаконы в концентрации 20-30 тыс.клеток/мл. по 2 мл на флакон. Суспензионные клетки Jurkat, культивируемые в среде RPMI-1640 + 2% фетальной сыворотки, рассевали в концентрации 300 тыс.клеток/мл.
Контрольные культуры культивировали в обычном термостате при температуре +370, опытные культуры культивировали в другом термостате, поставив на вложенную в него антенну от прибора. На 3-и сутки монослойные клетки снимали со стекла раствором версен/химопсин и количество выросших клеток подсчитывали в камере Фукса-Розенталя. Показатели полученных результатов выражали в % от контроля.
4. Результаты.
В первой серии опытов проводили изучение влияния разных режимов работы прибора на клетки ФЛЭЧ, А-549 и НеLа.
Было обнаружено, что разные режимы работы прибора оказывают противоположное воздействие на нормальные и раковые клетки, причем степень воздействия на клетки изменялась по синусоиде (Рис.1). Максимальное воздействие на клетки наблюдалось при режиме работы прибора –45- и –60-, при этом нормальные и раковые клетки диаметрально противоположно отвечали на эти режимы : при показаниях прибора - 45- наблюдалась наибольшая стимуляция пролиферации нормальных клеток ФЛЭЧ и наибольшее подавление их роста при режиме –60-. Совершенно по другому вели себя на этих режимах раковые клетки как НеLа, так и А-549 и Jurkat : на режиме –45- происходило максимальное подавление роста раковых клеток и стимуляция их роста на режиме –60-.Эффект воздействия работы прибора на раковые клетки не зависел от их происхождения и морфологии.
Таблица № 1. Влияние разных режимов работы прибора «ЛАД» на клеточные культуры .
|
Показания прибора
|
Показатели пролиферации клеток (% от контроля)
|
ФЛЭЧ
|
НеLa
|
А-54935
|
|
35
|
88,6
|
120
|
127,5
|
|
37,5
|
83.3
|
117,7
|
120,9
|
|
40,0
|
79.8
|
113,9
|
114
|
|
42,5
|
119,6
|
82.8
|
68,4
|
|
45,0
|
144,5
|
72.8
|
80,4
|
|
47,5
|
134,7
|
73.3
|
72,9
|
|
50,0
|
114
|
105,8
|
107,9
|
|
52,5
|
100,8
|
117,6
|
120,2
|
|
55,0
|
88,5
|
124,4
|
129,6
|
|
60,0
|
71,8
|
146,3
|
124,1
|
|
65,0
|
119,3
|
111.7
|
77,1
|
Во второй серии опытов изучали воздействие работы прибора, работающего при постоянном режиме –45-(отрицательное влияние на рост раковых клеток и стимуляция роста нормальных) при продолжительном культивировании клеток в течение 14 суток. Было обнаружено, что подавление роста раковых клеток оставалось постоянным на протяжении всего культивирования (две недели ), тогда как стимуляция пролиферации нормальных клеток снижалась к 14 дню культивирования. (Рис. 2).
Результаты, полученные при изучении пролиферации клеток путем их прямого подсчета, полностью подтверждены в экспериментах по определению активности дыхательных ферментов (метод МТТ).
Таблица 2. Влияние работы прибора «ЛАД» (в режиме 45 ) на пролиферацию клеток ФЛЭЧ и НеLа на протяжении 14 суток.
|
Продолжительность культивирования (в сутках)
|
Показатели пролиферации клеток (% от контроля)
|
ФЛЭЧ
|
НеLа
|
|
3
|
138,5
|
65,3
|
|
5
|
148,5
|
68,2
|
|
7
|
143,4
|
62,7
|
|
14
|
112,7
|
67,1
|
ГУ НИИ гриппа РАМН, лаборатория клеточных культур.
Ведущий научный сотрудник к.б.н. Смирнова Т.Д.
Старший научный сотрудник к.б.н. Еропкина Е.М..
|
|
